超微量分光光度計憑借僅需0.5–2μL樣品、無需比色皿、快速檢測核酸/蛋白濃度與純度的優勢,已成為分子生物學、基因組學及生物制藥實驗室的標配設備。因其依賴液滴表面張力形成光路,對操作潔凈度與環境極為敏感,可能會出現讀數漂移、A260/A280異常、基線噪聲大或液滴塌陷等問題??茖W識別并精準處置
超微量分光光度計故障,是保障數據可靠性的關鍵。

一、核酸濃度偏低或無讀數
原因分析:
樣品未正確置于檢測pedestal(上下光纖端面);
液滴體積不足(<0.5μL)或含有氣泡;
光纖端面污染或劃傷。
解決方法:
用移液器輕觸上臂,使液滴在上下檢測面間形成穩定“液橋”;
確保加樣量≥1μL,緩慢釋放避免氣泡;
每次使用前后用無絨布蘸無水乙醇擦拭上下檢測面,禁用紙巾或丙酮。
二、A260/A280比值異常(如DNA<1.7,RNA<2.0)
原因分析:
蛋白質或酚類殘留污染(比值偏低);
樣品稀釋液非匹配緩沖液(如用水代替TE);
檢測面殘留前次樣品交叉污染。
解決方法:
重新純化樣品(如柱純化或氯仿抽提);
使用與樣品制備相同的緩沖液作為空白(如10mMTris,pH8.0);
執行“Blank”校準后立即檢測,避免空氣污染物沉積。
三、重復性差(同一樣品RSD>5%)
原因分析:
移液器未校準或操作手法不一致;
環境濕度低(<30%),液滴快速蒸發;
樣品本身不均一(如未混勻或含顆粒)。
解決方法:
使用經校準的低吸附吸頭,垂直加樣;
在濕度40–60%環境中操作,或加蓋防蒸發罩(部分機型支持);
檢測前渦旋混勻,離心去除顆粒。
四、基線漂移或背景噪聲高
原因分析:
光源老化或光纖污染;
空白未正確校準(如用臟水或錯誤緩沖液);
強光直射檢測窗口。
解決方法:
每日開機后執行空白校準;
避免陽光或強燈光直射儀器;
若基線持續異常,運行儀器自檢程序或聯系工程師校準光源。